Parte 2 - Risposte a domande sulla bio-decontaminazione di vH2O2 in isolatori asettici

Nel nostro webinar "Biodecontaminazione con vH₂O₂: ottimizzazione dello sviluppo del ciclo negli isolatori asettici" rispondiamo a molte domande interessanti. In questo secondo blog di domande e risposte, il nostro moderatore Rick Nieskes di Ardien Consulting e Joni Partanen, Product Manager di Vaisala, rispondono alle domande rimaste in sospeso durante il webinar. 

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Domanda: Esiste una concentrazione minima necessaria per l'efficacia microbicida?  Ad esempio, una concentrazione di 100 ppm VHP al 95% RS sarebbe più efficace rispetto a una di 2.000 ppm al 60% RS?

Rick Nieskes:  Secondo la mia esperienza, basata su >150 isolatori valutati negli ultimi 25 anni, la risposta è no, nella maggior parte dei casi, in ogni modo raramente ho visto una concentrazione di 2.000 ppm (ammesso che esista) in un impianto tipico.  Per un processo a secco, ovvero mantenendo l'isolatore in condizioni tali da evitare condensa visibile, nella maggior parte dei casi si deve raggiungere circa il 75% di RS.  Tuttavia, questo dipende dalla posizione selezionata per il sensore che misura la %RS.  Se si imposta un punto target più elevato, ad es. 85-90%RS, si osserva un enorme miglioramento dell'efficacia.  

Come comparazione, supponiamo di mantenere la concentrazione costante.  Mi aspetto quindi che una concentrazione di 500 ppm al 95%RS restituirà valori D di circa 40 secondi, mentre 500 pmm al 50%RS restituirebbe valori D di circa otto minuti.  Si tratta di un'efficacia 12 volte superiore.  Tuttavia, analizzo questo aspetto caso per caso, perché vi sono molti altri fattori che influiscono su questi risultati, come la temperatura complessiva, il flusso d'aria, ecc.

Domanda: Ho una sonda Vaisala HPP272 che misura l'elevata concentrazione di vH₂O₂, umidità e temperatura. È possibile calibrarla solo per la lettura del vH₂O₂ a scopo di biodecontaminazione? 

Joni Partanen: Assicurati di eseguire il processo di spurgo prima del ciclo di biodecontaminazione. Così facendo si garantiscono le migliori performance di misurazione. Inoltre, è consigliabile calibrare lo strumento con il calibro di umidità a intervalli regolari. La calibrazione di fabbrica garantirà misurazioni di buona qualità per anni. Gli intervalli di calibrazione adeguati dipendono molto dall'applicazione, ma generalmente si raccomanda di iniziare prima con intervalli più brevi, per poi adattarli in base ai dati empirici raccolti.

Domanda: Come gestite gli indicatori biologici rogue durante gli studi dello sviluppo del ciclo?

Rick Nieskes:  Durante lo sviluppo del ciclo non accetto indicatori biologici rogue.  Se emerge un indicatore biologico positivo di crescita, lo considero un positivo reale.  In questi casi è preferibile eseguire uno studio separato con ulteriori indicatori biologici attorno alla posizione sospetta con una adeguata modifica in base al ciclo (ad es. tempo di esposizione più lungo, ecc.).
Sul mio sito web dispongo di un centro risorse con vari articoli molto utili. Per gli indicatori rogue, potrebbero essere interessanti questi articoli: 

"Heads or Tails: Statistical Methods for Interpreting Multiple BI Results" di Donald Eddington. PhD. Eddington and Bond Associates. Inc, Sep 2013.
“Using replicate BIs to evaluate bio-decontamination cycles in isolators” by Garrett Krushefski, Spore News Volume 9, No. 4

Domanda: È vero che utilizzando una concentrazione più elevata di H₂O₂ liquido può aiutare a evitare la condensa di vapori di H₂O₂ nelle aree più fredde durante la biodecontaminazione? 

Joni Partanen: Sì, è corretto. La concentrazione di vH₂O₂ aumenta rispetto al relativo livello di saturazione sia deumidificando l'ambiente prima della biodecontaminazione, sia utilizzando una soluzione con una concentrazione più elevata.

Abbiamo un blog su questo argomento: "Rapporto di concentrazione della soluzione di H₂O₂ punto di condensazione e vH₂O₂ massimo raggiungibile".

Inoltre abbiamo un articolo completo sui quattro parametri che influiscono maggiormente sia sulla condensazione che sul ppm massimo raggiungibile di vH₂O₂: "Influenza della condensazione sulla biodecontaminazione con vH₂O₂"

Domanda: Ho varie domande... la prima: come si controlla l'umidità? In secondo luogo, perché sconsiglia gli indicatori biologici confezionati Are Tyvek®? Senza Tyvek, non vi è un maggior rischio di contaminazione? 

Rick Nieskes:  Per quanto riguarda la prima domanda, di solito l'umidità viene controllata mediante un sistema di deumidificazione nell'ambito della fase di deumidificazione.  Secondo me, l'opzione migliore sarebbe un sistema che aggiunge o elimina l'umidità in modo da garantire che il valore nominale di umidità sia lo stesso per ogni ciclo di vH₂O₂ eseguito.

Per rispondere alla seconda domanda sugli indicatori biologici confezionati Tyvek®, ti darò una risposta breve qui e un link (sotto) che rimanda a una risposta più lunga. Il microrganismo consigliato per valutare l'efficacia della biodecontaminazione con vH₂O₂ è il Geobacillus stearothermophilus, che è un termofilo (cresce solo a temperature attorno ai 55 °C) ed è noto per essere patogeno per qualsiasi ospite.  Detto questo, è necessario un livello adeguato di attenzione quando si manipolano gli indicatori biologici.  Ti invito a leggere un blog da me pubblicato nel 2020 a questo proposito: 

Gli indicatori biologici confezionati Tyvek® sono adeguati per la decontaminazione con perossido di idrogeno vaporizzato?" 

Domanda: Ho letto un articolo in cui si affermava che il vH₂O₂ non è accettabile per la biodecontaminazione…?

Rick Nieskes: Sì, lo conosco. Tuttavia, ciò che si affermava in quell'articolo è che il vH₂O₂ non è consigliabile per l'utilizzo nella sterilizzazione delle superfici di contatto diretto e indiretto con i prodotti.  Tuttavia, do per scontato che, in condizioni ideali, il vH₂O₂ è un processo di biodecontaminazione sporicida per superfici esposte in grado di sterilizzare. Le condizioni ideali includono superfici che sono validate come pulite, senza punti di contatto superficie-superficie.  

Su questo argomento ho scritto anche un altro articolo qui: "Domande dal settore - Superfici di contatto del prodotto biodecontaminate con perossido di idrogeno vaporizzato (VHP)"

Domanda: Ha menzionato 5 BIs per 1 m³. Ha delle referenze per quella raccomandazione? 

Rick Nieskes:  Certo. Consultate: "PDA Technical Report No. 34, (TR 34) Design and Validation of Isolator Systems for the Manufacturing and Testing of Health Care Products", acquistabile dal PDA bookstore. 

Mi sono sempre opposto all'adattamento del PDA TR34 del 2001, che consiglia di utilizzare "da 5 a 10 Bls per metro cubo di volume di isolatore", quando in ogni posizione di studio viene posizionata una quantità tripla di indicatori biologici per la validazione del sistema di vH₂O₂ in tutte le sue forme (ad es. vaporizzato, micronebulizzato, ecc.).  Ho sempre pensato che il numero di posizioni di studio fosse insufficiente se in ogni posizione di studio si impiegano IB triplicati.  

Dopo alcuni studi, sono stato in grado di determinare che il TR34 è stato scritto supponendo che in ogni posizione di studio venisse posizionato un IB con un rapporto di 1:1 (tra IB e posizione di studio).  Quello era lo standard quando è stato scritto il TR34, prima che gli utenti iniziassero a sperimentare ciò che ora è noto come "postulato degli IB rogue".  Oggi, con l'evoluzione corrente della validazione con vH₂O₂, gli IB triplicati sono diventati la prassi standard, sebbene non siano un requisito in senso stretto.  

Pertanto, la moderna e corretta interpretazione del TR34 deve implicare minimo cinque posizioni di studio per metro cubo del volume della camera di lavoro.  In altre parole, se si devono utilizzare IB triplicati per ciascuna posizione di studio, si devono utilizzare minimo 15 IB per metro cubo del volume della camera di lavoro.  In base a queste informazioni, quindi, considero che il TR34 necessiti di una revisione che aiuti gli utenti ad adattare tali principi corretti durante la qualifica iniziale del ciclo di vH2O2 per i nuovi isolatori oppure durante i ciclo di riqualifica annuale del vH₂O₂ per gli isolatori esistenti.

Domanda: Qual è la risoluzione/precisione della sonda di vH₂O₂ HPP272?

Joni Partanen: La specifica di precisione può essere consultata nella Scheda tecnica prodotto delle sonde serie HPP270. Per mantenere la stabilità nel lungo termine, si consiglia di eseguire regolarmente la calibrazione in loco con un calibro di umidità. Inoltre, monitorando il valore di vitalità del sensore garantirete anche la stabilità nella HPP270. 

Un'ulteriore protezione è la funzione detta "Vitalità sensore" nel software Vaisala Insight, che consente di eseguire la diagnostica del sensore e visualizzare informazioni sul suo funzionamento. Un sensore della sonda HPP270 nuovo avrà una vitalità del 100%, mentre quella di un sensore al termine del suo ciclo di vita sarà dello 0%. Si consiglia di sostituire le sonde serie HPP270 quando la vitalità del sensore raggiunge un valore ≤ 40%. Infine, la calibrazione di fabbrica garantisce le prestazioni della sonda HPP270 per molti anni.

Scopri di più su Ardine Consulting o contatta Rick Nieskes.