Questions et réponses sur l'utilisation de l'indice de réfraction dans l'ultrafiltration intermédiaire du plasma sanguin

Ultrafiltration intermédiaire du plasma sanguin
Sciences de la vie

Au cas où vous auriez manqué notre wébinaire « Utiliser l'indice de réfraction pour garantir la qualité et la sécurité dans l'ultrafiltration intermédiaire du plasma sanguin », vous pouvez regarder ce bref aperçu ou l'intégralité du webinaire.

Au cours de ce webinaire en anglais, nous avons reçu beaucoup d'excellentes questions auxquelles nous n'avons pas pu répondre faute de temps. Voici toutes les questions avec leurs réponses sous la vidéo…

Question : Qu'entend-on par dn/dc ?    

Réponse : La notation fait référence à la pente ou à la sensibilité de l'impact sur l'indice de réfraction du changement de concentration en protéines. Dans la notation, n est l'indice de réfraction, c est la concentration en protéines et d fait référence à un changement différentiel. Les publications scientifiques utilisent la notation dn/dc pour désigner la relation entre l'indice de réfraction et la concentration en protéines.

Question : Quelle est la durée de vie de la source lumineuse du réfractomètre Vaisala ?  

Réponse : La source lumineuse LED de nos réfractomètres est extrêmement durable ; en effet, nous n'avons rencontré aucune panne de source lumineuse à ce jour. Nous avons des clients avec des installations de réfractomètre qui ont plus de 20 ans et qui fonctionnent toujours bien.

Question : Des pièces de votre réfractomètre nécessiteront-elles un remplacement au fil du temps ?

Réponse : Les réfractomètres Vaisala n'ont pas de pièces amovibles ou consommables, et ne sont pas sensibles à la dérive des mesures. Dites adieu aux pièces échangeables ou au réétalonnage. Vaisala propose des solutions spéciales de lavage de prisme que nous recommandons pour les applications exigeantes où les surfaces intérieures des tuyaux (et donc aussi le prisme) peuvent être recouvertes. Mais, en ce qui concerne l'application de filtration des protéines sanguines, nous ne nous attendons à aucun problème avec le revêtement du prisme.

Question : Si le liquide n'est pas homogène, comment l'indice de réfraction peut-il indiquer la concentration partielle d'un seul composant ?

Réponse : L'indice de réfraction est influencé par tous les constituants du liquide et, par conséquent, le réfractomètre indique toujours la concentration totale (solides dissous totaux) et non une concentration partielle du liquide. Dans une application d'ultrafiltration de plasma sanguin, où le liquide contient de nombreux constituants et où la matrice non protéique affecte également la mesure, la concentration en protéines peut être déterminée en fonction de la différence de l'indice de réfraction par rapport au perméat et au rétentat depuis le processus d'ultrafiltration.

Question : Quel sera l'impact du saccharose dans la solution sur la mesure de la concentration en protéines ?    

Réponse : À l'instar des protéines, les sucres dissous dans la solution augmenteront également l'indice de réfraction. La quantité de sucre peut être déterminée à partir d'une éventuelle phase précédente de préparation du milieu du procédé dans laquelle seul le saccharose est présent. 

Question : Nous avons une solution qui contient 8 % de saccharose. La concentration des anticorps monoclonaux (mAbs) est d'environ 120 g/L. Peut-on utiliser un réfractomètre pour mesurer ?    

Réponse : Oui, nous pouvons mesurer la concentration totale de la solution avec des réfractomètres, car le saccharose et les mAbs ont un effet sur l'indice de réfraction. Dans le processus d'ultrafiltration, les mesures du rétentat et du perméat permettent de distinguer la matrice non protéique.

Question : Quels protocoles de communication les réfractomètres utilisent-ils ?

Réponse : Les réfractomètres de la série PR-43 sont dotés de sorties mA et Ethernet. L'Ethernet communique sur la base du protocole UDP/IP, et les détails sont disponibles depuis le Guide de l'utilisateur de la série PR-43. Éventuellement, un convertisseur de bus de terrain pour FJB peut être utilisé si Modbus/TCP, Modbus RTU, Ethernet/IP, PROFIBUS ou PROFINET sont requis. 

Question : La mesure du réfractomètre Vaisala est-elle influencée par la matrice (nature et concentration) ? 

Réponse : L'indice de réfraction est influencé par tous les constituants du liquide ; par conséquent, le réfractomètre affiche toujours la valeur de concentration totale (solides dissous totaux). Les changements dans la matrice non protéique (par exemple, la concentration en sel) auront également un impact sur l'indice de réfraction, de sorte que les mesures de rétentat et de perméat sont importantes pour contrôler le processus d'ultrafiltration.

Question : Puis-je intégrer directement le signal du réfractomètre dans mon skid ou système de contrôle de l'automatisation ? Ou dois-je acheter le transmetteur ?

Réponse : Les réfractomètres des séries PR-43 et PR-33 de Vaisala peuvent être utilisés comme appareils autonomes. Autrement dit, vous pouvez directement intégrer le signal mA ou Ethernet du réfractomètre à votre système de contrôle de l'automatisation. L'interface utilisateur Web est incluse dans le réfractomètre. Les unités d'affichage physiques de l'interface utilisateur multicanale MI et de l'interface utilisateur compacte CI sont en option. Veuillez noter que les plus anciens réfractomètres de série PR-23 nécessitent le transmetteur DTR. 

Question : Cela n'est pas vraiment une question, mais dans le cadre des applications réfrigérées, les mesures de référence doivent être effectuées avec l'accessoire autonome sur le réfractomètre de procédé, car les instruments de paillasse ne peuvent pas se refroidir en deçà d'environ 15 °C…

Réponse : Nous sommes heureux d'apprendre que notre cuvette de test de laboratoire pour le réfractomètre PR-43-PC qui permet la thermostatisation de l'échantillon est bénéfique.

Question : Est-il possible d'avoir un rapport après validation à sauvegarder pour les audits ?    

Réponse : Oui. Notre procédure de vérification du réfractomètre est facile à réaliser et vérifie que le réfractomètre répond aux spécifications de précision de l'indice de réfraction. La procédure de vérification en rend compte.

Question : L'indice de réfraction dépend-il de la turbidité (par exemple, des particules) ?    

Réponse : Pas exactement. Les solides ou particules en suspension n'ont pas d'effet sur l'indice de réfraction, car il s'agit d'une mesure sélective pour la phase liquide et les solides dissous. Par conséquent, la turbidité est un paramètre différent de l'indice de réfraction. Si nous tenons compte de très petites particules, il existe une ligne où les particules peuvent être considérées comme dissoutes et commencent à avoir un impact sur l'indice de réfraction.

Question : Le réfractomètre peut-il être utilisé pour mesurer la concentration d'éthanol dans les suspensions de plasma ?

Réponse : En principe, oui. À l'instar de tous les autres constituants, la concentration en éthanol a également un impact sur l'indice de réfraction. Un réfractomètre ne peut pas mesurer sélectivement la part de concentration d'éthanol de la suspension de plasma. Au lieu de cela, des changements dans la concentration d'éthanol peuvent être détectés à partir de l'indice de réfraction.
Nous aurions besoin d'en savoir plus sur votre application particulière. Par exemple : quelle est la précision ou la répétabilité nécessaire pour les changements de concentration d'éthanol ? Quelles sont les conditions de température ? Y a-t-il des constituants autres que l'éthanol qui changent ? Veuillez nous contacter pour en parler davantage…

Question : Est-il possible de mesurer la concentration en protéines dans un mélange de protéines et d'adjuvant de filtration ?    

Réponse : Oui, le réfractomètre peut mesurer les solides dissous totaux du liquide. Mais pour répondre pleinement, nous aurions besoin de discuter de détails tels que le type d'adjuvant de filtration utilisé. Cela nous aiderait à déterminer tout impact sur l'indice de réfraction avant ultrafiltration, ainsi que sur le perméat et le rétentat.

Posez une question pour en savoir plus sur les avantages de l'indice de réfraction pour votre application.  

En savoir plus sur les réfractomètres dans les applications biotechnologiques. 
 

Note d'application : Concentration et filtration des protéines

Dans cette note d'application, vous apprendrez à utiliser les mesures de concentration en temps réel avec le réfractomètre Vaisala K‑PATENTS® Pharma. 

Contenus : 

  • Surveillance en temps réel de la concentration en protéines et des tampons pendant la concentration, le dessalage ou l'échange de tampon.
  • Procédure pour garantir des concentrations en tampons de protéines correctes.
  • Optimisation du rendement du produit et garantie de la pureté des protéines .
  • Procédure d'ajustement des niveaux de concentration après l'ultrafiltration.

Voir la note d'application (PDF)

Réfractomètres de procédé Vaisala K-PATENTS pour la fabrication de produits pharmaceutiques

Indice de réfraction pour la fabrication de produits pharmaceutiques et biotechnologiques

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