Ultrafiltração de plasma: suas dúvidas sobre índice de refração respondidas

Caso você ainda não tenha assistido a este webinar, “Usando o índice de refração para garantir a qualidade e a segurança na ultrafiltração intermediária de plasma sanguíneo”, você pode assistir agora sob demanda. Durante o webinar, recebemos muitas perguntas excelentes que não tivemos tempo de responder. Aqui estão todas as perguntas, com as respostas:

Pergunta: O que é dn/dc?

Resposta: Esta notação se refere à inclinação ou sensibilidade de quanto o índice de refração é impactado por uma mudança na concentração de proteína. Na notação, n é o índice de refração, c é a concentração de proteína e d refere-se a uma mudança diferencial. Publicações científicas usam a notação dn/dc para descrever a relação entre o índice de refração e a concentração de proteína.

Pergunta: Qual é a vida útil da fonte de luz do refratômetro Vaisala?

Resposta: A fonte de luz LED em nossos refratômetros é extremamente durável; até o momento, não tivemos nenhuma falha de fonte de luz. Temos clientes com instalações de refratômetros com mais de 20 anos de uso e ainda funcionando bem.

Pergunta: Existem peças no seu refratômetro que precisarão ser substituídas com o tempo?

Resposta: Os refratômetros Vaisala não possuem peças móveis ou consumíveis, nem são suscetíveis a desvio de medição. Não há necessidade de peças de reposição ou recalibração. A Vaisala oferece soluções especiais para lavagem do prisma, que recomendamos para aplicações exigentes onde as superfícies internas dos tubos (e, portanto, também o prisma) podem ficar revestidas. No entanto, para aplicações de filtração de proteínas do sangue, não esperamos problemas com revestimento do prisma.

Pergunta: Se o líquido não é homogêneo, como o índice de refração pode indicar a concentração parcial de apenas um componente?

Resposta: O índice de refração é impactado por todos os constituintes do líquido; portanto, o refratômetro sempre mostra a concentração total (sólidos totais dissolvidos), e não a concentração parcial de um componente. Em uma aplicação de ultrafiltração de plasma sanguíneo, onde o líquido possui muitos constituintes e a matriz não proteica também afeta a medição, a concentração de proteína pode ser determinada com base na diferença do índice de refração entre o permeado e o retentado do processo de ultrafiltração.

Pergunta: Como a sacarose na solução impacta a medição da concentração de proteína?

Resposta: Assim como as proteínas, os açúcares dissolvidos na solução também aumentam o índice de refração. A quantidade de açúcar pode ser determinada a partir de uma fase anterior de preparação do meio do processo, na qual apenas a sacarose está presente.

Pergunta: Temos uma solução que contém 8% de sacarose. A concentração de anticorpos monoclonais (mAbs) é de aproximadamente 120 g/L. Podemos usar um refratômetro para medir?

Resposta: Sim, podemos medir a concentração total da solução com refratômetros, pois tanto a sacarose quanto os mAbs afetam o índice de refração. No processo de ultrafiltração, as medições do retentado e do permeado permitem distinguir a matriz não proteica.

Pergunta: Quais protocolos de comunicação os refratômetros utilizam?

Resposta: Os refratômetros da série PR53 possuem saídas mA e Ethernet. A comunicação Ethernet é baseada no protocolo UDP/IP, e detalhes podem ser encontrados no Guia do Usuário da série PR53. Opcionalmente, um conversor de Fieldbus FJB adicional pode ser utilizado caso sejam necessários Modbus/TCP, Modbus RTU, Ethernet/IP, PROFIBUS ou PROFINET.

Pergunta: A medição do refratômetro Vaisala é influenciada pela matriz (natureza e concentração)?

Resposta: O índice de refração é impactado por todos os constituintes do líquido; portanto, o refratômetro sempre mostra o valor da concentração total (sólidos totais dissolvidos). Mudanças na matriz não proteica (por exemplo, concentração de sal) também impactarão o índice de refração, por isso as medições tanto do retentado quanto do permeado são importantes para controlar o processo de ultrafiltração.

Pergunta: Posso integrar diretamente o sinal do refratômetro ao meu skid ou sistema de controle de automação, ou preciso adquirir o transmissor?

Resposta: Os refratômetros Vaisala podem ser usados como dispositivos independentes, ou seja, você pode integrar diretamente o sinal mA ou Ethernet do refratômetro ao seu sistema de controle de automação. A Interface Web do Usuário está incluída no refratômetro. As unidades de display físico — Interface de Usuário Multicanal (MI) e Interface de Usuário Compacta (CI) — são opcionais.

Pergunta: Não é bem uma pergunta, mas para aplicações refrigeradas, as medições de referência devem ser feitas com o acessório independente no refratômetro de processo, pois instrumentos de bancada não conseguem resfriar abaixo de cerca de 15 °C...

Resposta: Ficamos felizes em saber que nossa cubeta de teste laboratorial para o refratômetro PR53AC, que permite a termostatização da amostra, é benéfica.

Pergunta: É possível ter um relatório após a validação para ser salvo em auditorias?

Resposta: Sim. Nosso procedimento de verificação do refratômetro é fácil de realizar e verifica se o refratômetro atende à especificação de precisão do índice de refração. O procedimento de verificação gera um relatório disso.

Pergunta: O índice de refração depende da turbidez (por exemplo, partículas)?

Resposta: Não exatamente. Sólidos suspensos ou partículas não afetam o índice de refração, pois é uma medição seletiva para a fase líquida e sólidos dissolvidos. Portanto, a turbidez é um parâmetro diferente do índice de refração. Se considerarmos partículas muito pequenas, há um ponto em que as partículas podem ser consideradas dissolvidas e começam a impactar o índice de refração.

Pergunta: O refratômetro pode ser usado para medir a concentração de etanol em suspensões de plasma?

Resposta: Em princípio, sim. Assim como todos os outros constituintes, a concentração de etanol também afeta o índice de refração. Um refratômetro não pode medir seletivamente apenas a concentração de etanol na suspensão de plasma. Em vez disso, mudanças na concentração de etanol podem ser detectadas pelo índice de refração. Precisaríamos saber mais sobre sua aplicação específica. Por exemplo: qual é a precisão ou repetibilidade necessária para as mudanças na concentração de etanol? Quais são as condições de temperatura? Existem outros constituintes variando além do etanol? Por favor, entre em contato conosco para discutir mais detalhes.

Pergunta: É possível medir a concentração de proteína em uma mistura de proteínas e auxiliar de filtração?

Resposta: Sim, o refratômetro pode medir os sólidos totais dissolvidos do líquido. Mas, para responder completamente, precisaríamos discutir detalhes como o tipo de auxiliar de filtração utilizado. Isso nos ajudaria a determinar qualquer impacto no índice de refração antes da ultrafiltração, bem como no permeado e no retentado.

Faça uma pergunta para saber mais sobre como o índice de refração pode beneficiar sua aplicação.

Saiba mais sobre refratômetros em aplicações de biotecnologia e farmacêuticas.